用鼠尾膠原蛋白進(jìn)行膠原收縮測(cè)定

ACOX3 功能障礙是頸內(nèi)動(dòng)脈復(fù)發(fā)性自發(fā)性血管痙攣的潛在原因

使用的先進(jìn) BioMatrix 產(chǎn)品：

RatCol® I 型鼠尾膠原蛋白 (4 mg/ml) 和中和溶液（包含在鼠尾膠原蛋白試劑盒中）

產(chǎn)品的使用方式：

我們的膠原蛋白用于形成 3D 水凝膠，并用 HASMC 播種/嵌入。作為膠原蛋白收縮測(cè)定的一部分，每 24 小時(shí)測(cè)量一次膠原蛋白水凝膠。

文章摘要：

顱外頸內(nèi)動(dòng)脈復(fù)發(fā)性自發(fā)性血管痙攣（RSV-eICA）是導(dǎo)致年輕人缺血性卒中的一個(gè)鮮為人知的原因。然而，其病理生理學(xué)仍然很大程度上未知。通過(guò)對(duì)受 RSV-eICA 影響的兩個(gè)韓國(guó)異卵雙胞胎兄弟的 ACOX3 基因進(jìn)行全外顯子組測(cè)序，我們鑒定了兩種復(fù)合雜合錯(cuò)義變異 c.235 T >G (p.F79 V) 和 c.665G>A (p.G222E) ）。計(jì)算機(jī)分析表明，這兩種變體均被歸類為致病性。體外 ACOX3 酶測(cè)定表明 F79 V 和 G222E 突變體實(shí)際上沒(méi)有酶活性。為了確定突變體對(duì)血管痙攣的影響，我們對(duì)人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞（HASMC）進(jìn)行了膠原收縮測(cè)定。

Carbachol 是一種膽堿能激動(dòng)劑，可誘導(dǎo) HASMC 收縮。使用 siRNA 敲低 HASMC 中的 ACOX3，可顯著抑制由卡巴膽堿引發(fā)的 HASMC 收縮。通過(guò)編碼siRNA抗性野生型ACOX3的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染，卡巴膽堿誘導(dǎo)的HASMC收縮得到恢復(fù)，但通過(guò)ACOX3 G222E轉(zhuǎn)染或ACOX3 F79V和ACOX3 G222E共轉(zhuǎn)染則不能恢復(fù)，表明兩種ACOX3突變體抑制卡巴膽堿誘導(dǎo)的HASMC收縮。我們認(rèn)為 ACOX3 功能障礙會(huì)引起基底主動(dòng)脈肌源張力的長(zhǎng)期喪失。結(jié)果，頸內(nèi)動(dòng)脈中間段的平滑肌（其中交感神經(jīng)支配特別豐富）變得對(duì)擬交感神經(jīng)刺激（例如劇烈運(yùn)動(dòng)）過(guò)敏，導(dǎo)致復(fù)發(fā)性血管痙攣。因此，ACOX3功能障礙可能是RSV-eICA的致病機(jī)制。我們第一次報(bào)道了 ACOX3 可能參與維持人動(dòng)脈平滑肌的基礎(chǔ)肌源張力。